¿Qué es un ensayo ELISA?

Un ensayo ELISA es un proceso de prueba que detecta sustancias para identificar ciertas enfermedades, alergias y drogas ilegales en el cuerpo. También se sabe que se usa para detectar el virus de inmunodeficiencia humana (VIH). Algunas de las sustancias que puede detectar son anticuerpos, hormonas y proteínas. El principio principal detrás del ensayo ELISA es que una reacción química entre la muestra líquida de un paciente y una muestra de laboratorio específica indica la presencia de cierta sustancia asociada con una enfermedad o afección médica específica. ELISA, como acrónimo, significa "ensayo de inmunosorción ligada a enzimas".

La invención y el desarrollo del ensayo ELISA se produjeron porque había una necesidad de un método de prueba más seguro que no sea el radioinmunoensayo, que utiliza la radiactividad para producir una reacción química. En la década de 1960, dos grupos separados de científicos encabezados por Stratis Avrameas y GB Pierce lograron asociar ciertos anticuerpos con ciertas enzimas y producir una reacción química a partir de la combinación. Con este conocimiento a mano, dos científicos de la Universidad de Estocolmo, Peter Perlmann y Eva Engvall, inventaron el método ELISA, publicando sus experimentos y el sistema detrás del ensayo en 1971. Desde entonces, el ensayo ELISA se ha utilizado en todo el mundo, aunque el radioinmunoensayo es todavía disponible debido a su menor costo.

Hay dos tipos comunes de ensayo ELISA: el método directo y el método indirecto, siendo este último el más utilizado. El primer paso sería extraer una muestra del paciente, generalmente sangre u orina, que pueden sufrir un proceso de separación para extraer el suero transparente que contiene los anticuerpos. Un kit de ELISA a menudo contiene una placa que contiene 96 mini-contenedores llamados "pozos", que estarán recubiertos con un antígeno que posiblemente pueda tener una reacción a un anticuerpo presente. Un antígeno a menudo se considera una sustancia extraña que el cuerpo ataca al producir anticuerpos específicos, por lo que si un paciente ha adquirido un antígeno de una determinada enfermedad, su suero debe contener anticuerpos que correspondan a dicho antígeno.

El suero del paciente se vertirá en los pocillos y luego se incubará para permitir que los anticuerpos se adhieran al recubrimiento de proteínas. Después del período de incubación, los pocillos se enjuagan para eliminar el resto del suero y otros anticuerpos que no se han unido al recubrimiento. Otro conjunto de anticuerpos extraídos de animales, generalmente ratas, se verterá en los pocillos para detectar los anticuerpos humanos, y tendrá lugar otro período de incubación y los anticuerpos animales se eliminarán nuevamente. Luego se agregará un sustrato enzimático para que la reacción se pueda ver visiblemente en colores. Típicamente, un tono de color fuerte indicará un resultado positivo, lo que significa que el paciente tiene la enfermedad u otras condiciones médicas evaluadas.