¿Qué es la fluorescencia cuantitativa?
La fluorescencia cuantitativa es la exposición de radiación emitida en una muestra. Usando la tecnología de imágenes, un científico puede recopilar información sobre el espécimen y usarlo para aprender más sobre su estructura o función. Este enfoque se usa comúnmente en biología para estudiar células individuales y organismos completos. Requiere acceso a un laboratorio que contenga equipos de microscopía y cámaras de sensibilidad adecuada. Se pueden ver ejemplos de imágenes de esta forma de análisis en libros de texto y artículos científicos, junto con discusiones sobre los datos obtenidos.
Las muestras preparadas para imágenes de microscopio se pueden teñir con etiquetas fluorescentes, como proteínas que se unen a estructuras específicas en la célula. Cuando estas etiquetas se ven a través de una cámara en las condiciones adecuadas, se iluminan. Simplemente observar la iluminación puede proporcionar información importante para el investigador. Por ejemplo, un inmunólogo que busca rastros de un anticuerpo específico podría usar una etiqueta para identificarlo. Este es un ejemplo de fluorescencia cualitativa, donde la iluminación proporciona información general sobre las cualidades de la muestra.
En las mediciones de fluorescencia cuantitativa, el investigador recopila información específica y medible. Esto podría incluir datos sobre la intensidad precisa de la luz. El tratamiento adicional de la muestra puede ofrecer oportunidades para técnicas de imagen avanzadas como la recuperación fluorescente después del blanqueamiento fotográfico (FRAP), que proporciona información sobre el movimiento de las estructuras dentro de las muestras. Todas estas técnicas cuantitativas de fluorescencia pueden ofrecer una nueva visión de qué es una estructura, cómo funciona y qué contiene.
Se requiere equipo de precisión para este tipo de trabajo. Cualquier tratamiento fluorescente agregado a una muestra debe prepararse cuidadosamente para que etiquete las estructuras deseadas y nada más. El equipo debe ser adecuadamente sensible y calibrado para confirmar que está recogiendo información precisa. Si el detector en una cámara digital está apagado, por ejemplo, puede fallar al recoger la fluorescencia en algunas partes de la muestra, o podría generar una lectura falsa. En ambos casos, los datos serían incorrectos.
Los laboratorios de patología pueden usar fluorescencia cuantitativa para la evaluación de algunas muestras. Esta técnica también se usa ampliamente en la investigación. Se pueden desarrollar algunas imágenes muy llamativas con la ayuda de etiquetas fluorescentes para separar estructuras como nervios o proteínas específicas. Además de ser visualmente notables, las imágenes pueden contener una gran cantidad de información para los investigadores con la capacidad de leerlas. Es posible analizar imágenes cuantitativas de fluorescencia con programas informáticos avanzados para extraer más datos y generar resultados significativos.